Клиническая эффективность применения БАД «Семена лопуха» в терапии мастопатии

Эффективным способом коррекции изменений, происходящих при фиброзно-кистозной болезни молочных желез, является применение фитотерапии. Использование сборов лекарственных растений не только позволяет корригировать процессы в ткани молочных желез, но и положительно воздействует на заболевания других органов и систем, сопутствующие дисгормональной дисплазии молочных желез.

Одним из патогенетических средств лечения диффузной дисгормональной дисплазии молочных желёз, по данным зарубежной и отечественной литературы, является препарат семян льна, который содержит типичные фитоэстрогены (лигнаны и изофлавоны) в большом количестве. Эти вещества обладают потенциальной противораковой биологической активностью. В экспериментах на лабораторных крысах показано, что добавление в рацион семян льна (от 5 до 10 %) приводит к изменениям гормонального фона и структуры молочных желез, которые связаны со снижением риска возникновения злокачественных опухолей. Некоторые авторы связывают противоопухолевый эффект семян льна у экспериментальных животных не только с лигнанами, но и с альфа-линоленовой кислотой. Однако нет данных о действии семян льна на молекулярные механизмы регуляции гиперпластических процессов, а именно, у пациенток с дисгормональной дисплазией молочных желёз.

Известен способ лечения фиброзно-кистозной болезни молочных желез с использованием индол-3-карбинола («Индинола», выделенного из молодых побегов брокколи) - вещества, метаболиты которого обладают выраженными антиэстрогенными свойствами; в частности, индол-3-карбинол нормализует обмен эстрогенов путем индукции активности цитохрома CYP1A1, ответственного за преимущественное образование 2-гидроксиэстрона. Кроме этого, индинол способен блокировать проведение сигналов в опухолевые клетки, побуждающие к их активному делению, а также способен индуцировать в опухолевых клетках процессы апоптоза, ведя к программируемой клеточной гибели (Киселёв В.И., Лященко А.А., 2005). Недостатком данного способа лечения является отсутствие действия препарата на центральные звенья патогенеза мастопатии, он не снижает уровень пролактийа. Длительный прием препаратов группы индолов (в связи с зобогенным эффектом) не показан при дисфункциях щитовидной железы, которые часто сопровождают фиброзно-кистозную болезнь молочных желез (Takahashi N., Ojika М., Dogasaki С., et al., 2000).

Новым в предлагаемом нами способе является назначение препарата с противоопухолевой активностью, обладающего как центральным механизмом действия на гипоталамо-гипофизарную систему (снижает уровень пролактина), так и действием на молекулярные механизмы регуляции пролиферативных процессов. Только в семенах лопуха содержатся гликозиды: арктиин, арктигенин (до 5 %), обладающие доказанной в экспериментальных исследованиях противоопухолевой активностью.

Препарат БАД «Семена лопуха» производится ООО «Биолит» (Россия, г. Томск) и представляет собой измельченные семена лопуха, которые заготавливают ранней весной в экологически чистых районах Томской области и Алтайского края. Форма выпуска: 190 капсул в пластмассовом флаконе. Препарат разрешён к применению в медицинской практике, свидетельство о государственной регистрации № 77.99.11.3.У.759.2.10 от 15.02.2010г. БАД «Семена лопуха» назначают внутрь, в дозе по 3 капсулы 3 раза в день во время еды в течение 6 недель.

Предлагаемый способ основан на анализе результатов контролируемого сравнительного рандомизированного клинического исследования в параллельных группах предлагаемого антипролиферативного средства под названием «Семена лопуха», которое проведено на 75 пациентках: группа «Семена лопуха» состояла из 50 человек, группа Плацебо состояла из 25 человек, контрольную группу составили 25 практически здоровых женщин, сопоставимых с основной группой по возрасту, без соматической и гинекологической патологии. В исследование вошли пациентки, имеющие на момент обследования диагноз диффузной дисгормональной дисплазии молочных желёз; возраст от 18 до 45 лет; отсутствие узловых форм дисгормональной дисплазии молочных желёз; отсутствие нейроэндокринных заболеваний; в момент исследования пациентки не принимали гормональные препараты. Диффузная дисгормональная дисплазия молочных желёз подтверждена комплексным ультразвуковым исследованием молочных желёз и маммографией (по показаниям). Критериями исключения являлись: возраст до 18 лет или более 45 лет; беременность; период грудного вскармливания; наличие других противопоказаний для приема препарата по результатам клинического обследования и сбора анамнеза; декомпенсированные заболевания, которые могли повлиять на проведение исследования; гиперчувствительность к любому из компонентов препарата; участие в других клинических исследованиях в течение предыдущего месяца.

Препарат «Семена лопуха» назначали в течение 6 недель, Плацебо - также 6 недель. Оценка клинической эффективности применения «Семян лопуха» проводилась по изменениям показателей маркёров клеточной пролиферации: фактора некроза опухоли-альфа (TNF-a) и интерлейкина-10 (НЛО); при динамическом физикальном и ультразвуковом методах исследования оценивалось состояние молочных желёз; по показателям маммографии. Определение уровней TNF-a и IL 10 в супернатантах проводили с использованием твердофазного иммуноферментного «сэндвич»-метода по инструкциям, предлагаемым производителями тест-систем («Procon», Россия; «Cytimmune», США). Учет результатов проводили с помощью фотометра для микропланшетов «Multiscan ЕХ» («ThermoLabSystems », Финляндия). Концентрацию цитокинов вычисляли по калибровочной кривой. Данные выражали в пг/мл.

В результате выполненного исследования установлено, что при назначении «Семян лопуха» за счет действующих веществ, имеющих антипролиферативное действие, достоверно снижается содержание фактора некроза опухоли-альфа (TNF-a), ответственного за стимуляцию пролиферативных процессов, и повышается содержание интерлейкина-10 (IL 10), обладающего антипроли- феративным действием, а также снижается уровень пролактина. Применение «Семян лопуха» при терапии различных клинических форм диффузной дисгормональной гиперплазии молочных желёз (фиброзно-кистозной мастопатии) в качестве средства, снижающего риск развития злокачественной патологии молочных желёз за счёт нормализации содержания основных цитокинов - регуляторов клеточного ответа, является статистически достоверно высокоэффективным.

Все вошедшие в исследование пациентки закончили его без побочных эффектов и явлений. Отклонений от протокола в ходе исследования не определено. Таким образом, примененный в исследовании вариант терапии, судя по полученным результатам, является абсолютно безопасным для испытуемых.

Курсовой приём (в течение 6 недель) препарата «Семена лопуха» в терапии различных клинических форм диффузной дисгормональной гиперплазии молочных желёз (фиброзно-кистозной мастопатии) за счёт повышения в организме спонтанной и ФГА- стимулированной продукции лимфоцитами периферической крови интерлейкина-10 (IL 10) и снижения продукции фактора некроза опухоли-альфа (TNF-a) через молекулярные механизмы регуляции процессов апоптоза блокирует один из ключевых путей патологической клеточной пролиферации в тканях молочных желёз. Полученные результаты свидетельствуют также в пользу того, что курсовой прием «Семян лопуха» в обозначенной дозе является абсолютно безопасным для пациентов.

В анализ эффективности проведенного варианта назначения препарата «Семена лопуха» для патогенетического лечения фибрознокистозной мастопатии, а именно, диффузной дисгормональной дисплазии молочных желёз (ДДЦМЖ), вошли все пациентки, закончившие исследование.

На сегодняшний день доказано, что гормонозависимая пролиферация тканей молочной железы может быть эстрогензависимая, пролактинзависимая и прогестеронзависимая. Оценка эффективности применения препарата «Семян лопуха» в качестве средства снижения активности процессов гормонозависимой пролиферации проводилась по результатам влияния его на состояние уровней основных цитокинов, являющихся регуляторами молекулярных механизмов клеточной пролиферации в сравнительном аспекте с «не-назначением» (группа Плацебо) терапии при фиброзно-кистозной мастопатии. В результате проведенного исследование отмечены достоверные (р<0,05) положительные результаты применения препарата «Семена лопуха» с целью нормализации баланса соотношения основных цитокинов, участвующих в молекулярной регуляции патологической клеточной пролиферации гормонозависимой ткани молочных желёз.

Полученные данные показателей ультразвукового исследования позволили разделить пациенток с ДДЦМЖ на три группы: ДДДМЖ с преобладанием железистого компонента (n=25); ДДДМЖ с преобладанием кистозного компонента (n=16) и ДДДМЖ с преобладанием фиброзного компонента (n=9).

Средний возраст пациенток с ДДДМЖ в исследовании составил 35,2±0,5 года. Средний возраст пациенток с ДДГМЖ с преобладанием железистого компонента был 23,2+0,4 года, пациенток с ДДДМЖ с преобладанием кистозного компонента - 31,3+0,3 года и пациенток с ДДГМЖ с преобладанием фиброзного компонента - 37,4±0,5 года.

При изучении уровней спонтанной и ФГА-стимулированной продукции лимфоцитами периферической крови интерлейкина-10 (IL 10) и фактора некроза опухоли-альфа (TNF-a) при ДДДМЖ выявлено, что средние значения показателей достоверно (р<0,05) меняются с изменением клинического варианта мастопатии.

Было установлено статистически значимое (р<0,01) повышение ФГА-стимулированной продукции дискриминантного в реализации стимулирующего влияния на пролиферативный потенциал клеток TNF-a у всех обследованных пациенток с ДДДМЖ. Уровень конституционального синтеза этого интерлейкина также был выше нормы. Индекс стимуляции секреции цитокина существенно (р<0,01) повышался при каждом клиническом варианте ДДДМЖ. Уровни спонтанной продукции TNF-a при ДДДМЖ с преобладанием железистого компонента составил 110,64±8,35 пг/ мл и ФГА-стимулированной - 258,05±19.05 пг/мл, при ДДДМЖ с преобладанием кистозного компонента - 124,43±15,25 пг/мл и 195,37±12,25 пг/мл соответственно, а при ДДДМЖ с преобладанием фиброзного компонента-135,73±12,15 пг/мл и 351,34± 11,10 пг/мл соответственно (в контрольной группе - 62,85±4,35 пг/мл и 140,05±18,00 пг/мл соответственно). Уровни спонтанной продукции IL 10 при ДДДМЖ с преобладанием железистого компонента составил 84,25±2,45 пг/мл и ФГА-стимулированной - 181,55±19,05 пг/мл, при ДДДМЖ с преобладанием кистозного компонента - 75,01±3,25 пг/мл и 150,14±6,75 пг/мл соответственно, а при ДДДМЖ с преобладанием фиброзного компонента - 60,50±4,05 пг/мл и 128,56±13,05 пг/мл соответственно (в контрольной группе - 95,21±7,85 пг/мл и 198,90±17,45 пг/мл соответственно).

При курсовом в течение 6 недель применении препарата «Семена лопуха» в лечении фиброзно-кистозной болезни молочных желез зарегистрировано достоверное (р<0,05) снижение и нормализация как спонтанной, так и ФГА-стимулированной продукции лимфоцитами периферической крови TNF-a от 124,23± 16,00 пг/мл до 72,33±6,79 пг/мл и от 294,30±14,15 пг/мл до 136,31±13,19 пг/мл соответственно. Выявлено достоверное (р<0,05) повышение и нормализация как спонтанной, так и ФГА-стимулированной продукции лимфоцитами периферической крови IL10 от 78,01±5,20 пг/мл до 98,58±5,04 пг/мл и от 145,15±3,70 пг/мл до 189,56±12,04 пг/мл соответственно.

Таблица 6
Спонтанная и ФГА-стимулированная продукция лимфоцитами периферической крови TNF-a и IL10 у пациенток с ДДДМЖ (X ± m, p)

В группе Плацебо через 6 недель выявлена тенденция к сохранению значений уровней цитокинов. Данный факт подтверждает влияние «Семян Лопуха» на баланс ключевых цитокинов, являющихся регуляторами молекулярных механизмов клеточного пролиферативного ответа, что и обуславливает патогенетическое лечение фиброзно-кистозной болезни молочных желёз.

Таблица 7
Спонтанная и ФГА-стимулированная продукция лимфоцитами периферической крови TNF-a и IL 10 у пациенток с ДДДМЖ, принимающих Семена лопуха (X ± m, p)

Полученные данные свидетельствуют о том, что у пациенток с мастопатией, в отличие от здоровых женщин, дисбаланс цитокинов, осуществляемый через иммунную систему, ориентирован на стимуляцию продукции TNF-a и снижение продукции IL 10. Подобное смещение цитокинового баланса создаёт предпосылки для стимуляции пролиферативных процессов в тканях молочных желёз через молекулярные механизмы регуляции гиперпластических процессов.

На сегодняшний день доказано, что гормонзависимая пролиферация тканей молочной железы может быть эстрогензависимая, про-лактинзависимая и прогестеронзависимая. Наибольший риск для дальнейшего развития гормонзависимого рака молочных желёз имеет именно эстрогензависимая пролиферация. Поэтому оценка эффективности применения БАД «Семена лопуха» в качестве средства снижения активности процессов гормонозависимой пролиферации проводилась по результатам влияния его на состояние уровней ключевых метаболитов эстрогенов в сравнительном аспекте с «неназначением» (группа Плацебо) терапии при фиброзно-кистозной мастопатии.

Этиология и патогенез мастопатии до настоящего времени являются предметом дискуссий. Вопрос о роли гормонов остаётся узловым пунктом всей проблемы. Роль гиперэстрогенемии подтверждается многими клиническими наблюдениями о частом сочетании мастопатии с нейроэндокринными нарушениями менструальной и репродуктивной функций.

Диагностика гормонального (эстрогенового) статуса по уровню гормонов сыворотки крови зачастую не дает точной картины гормонального баланса (суммарный уровень эстрогена бывает нормальным при уже нарушенном балансе метаболитов эстрогена). Кроме того, эстрогеновой активностью обладают только свободные метаболиты эстрогена эстрадиола, а в сыворотке крови определяется в большинстве связанный эстрадиол. Таким образом, гормональный анализ крови имеет определённую погрешность.

В свете последних научных знаний об эстрогенах необходимо точно определять их уровень, т.е. необходимо знать уровень свободных метаболитов «главного эстрогена»-эстрадиола: 16αОНЕ1 и2-ОНЕ1. Это вызвано тем, что сегодня сформировано новое понимание механизмов участия эстрогенов в качестве «промоторов» и «инициаторов» в процессе канцерогенеза в органах-мишенях: а) максимальный риск развития гормонзависимых опухолей связан в основном с уровнем соотношения 16α -гидроксиэстрона и 2-гидроксиэстрона - основных метаболитов эстрадиола; б) 16αОНЕ1 - «канцероген», ключевой «агрессивный» метаболит, влияющий на механизмы пролиферации в органах, содержащих эстрогеновые рецепторы; в) 16αОНЕ1 активнее эстрадиола в 40 раз; г) 2-ОНЕ1- «умеренный» метаболит, влияет на механизмы регуляции апоптоза; д) баланс соотношения 2-ОНЕ1/16αОНЕ1 - новый биомаркер, количественный индикатор степени выраженности пролиферативной патологии (Ашрафян Л.А., Киселев В.И., Муйжнек Е.Л., 2009).

Из всех обследованных 85 % женщин основной группы имели коморбидную гинекологическую и экстрагенитальную патологию. При обследовании выявлено, что пациентки с ДДМЖ с преобладанием фиброзного компонента в 92 % случаев имели пролиферативное заболевание в виде миомы матки, эндометриоза и/или гиперплазии эвдометрия (r = 0,94; р<0,05). Пациентки с ДДГМЖ с преобладанием фиброзного компонента имели также высокий удельный вес соматической патологии. Основными экстрагенитальными заболеваниями были: метаболический синдром (75 %), хроническая патология печени (54 %), патология щитовидной железы (46 %). Пациентки с ДДМЖ с преобладанием железистого компонента в 52 % случаев имели нарушения менструального цикла, как правило, по типу менометроррагии (44 %). У пациенток с ДДМЖ с преобладанием железистого компонента достоверно (r = 0,83; р<0,05) чаще диагностировались предменструальный синдром (76 %) и опухолевидные образования (кисты) яичников (34 %). Из соматической патологии ведущей нозологией был субклинический гипотиреоз (78 %). Пациентки с ДДГМЖ с преобладанием кистозного компонента по состоянию соматического и гинекологического здоровья занимали промежуточные показатели между значениями выше описанных групп соответственно (r = 0,78; р<0,05).

Данные уровней ФСГ и эстрадиола в сыворотке крови и величины коэффициента ФСГ/ЛГ, полученные на 5-8 день менструального цикла, а также результаты кольпоцитологического исследования влагалищного мазка на степень эстрогенной насыщенности по Geist и Salmon при сравнении их с показателями контрольной группы, позволили сделать вывод о наличии ДДГМЖ, как правило, у пациенток с явлениями гиперэстрогенового гормонального фона. Поэтому, для подтверждения представленной выше гипотезы, все обследуемые пациентки были распределены на подгруппы в зависимости от выявленного в период обследования гормонального фона. Полученные данные показателей ФСГ и Е2 позволили разделить пациенток на подгруппы: ДДМЖ на фоне гипоэстрогенемии; ДДМЖ на фоне нормоэстрогенемии и ДДМЖ на фоне гиперэстрогенемии. Базальные уровни ФСГ и Е2 в контрольной группе соответствовали средним нормальным значениям здоровых женщин соответствующего им возраста. Выявлено, что развитие и изменение клинического варианта выраженности ДДГМЖ сопровождается повышением среди обследованных количества пациенток с гиперэстрогенемией (r = 0,84, р<0,05). Таким образом, при диффузной дисгормональной гиперплазии молочных желёз у пациенток происходят изменения гормонального статуса в виде нарушений функциональных взаимоотношений гипофизарно-яичниковой системы. Это проявляется увеличением общего числа пациенток с явлениями гиперэстрогенемии и увеличением их доли с изменением формы диффузной мастопатии.

При изучении уровней и коэффициента соотношения метаболитов эстрогенов при ДДГМЖ выявлено, что средние значения показателя 16αОНЕ1 достоверно (р<0,05) повышаются с изменением клинического варианта мастопатии. Уровень 2-ОНЕ1 при ДДМЖ с преобладанием железистого компонента составил 8,60+0,75 нг/ мл, при ДДГЖ с преобладанием кистозного компонента - 8,45+0,80 нг/мл, а при ДДМЖ с преобладанием фиброзного компонента - 7,65±0,50 нг/мл (в контрольной группе - 9,92+1,20 нг/мл). Уровень 16αОНЕ1 при ДДГМЖ с преобладанием железистого компонента составил 5,18+0,45 нг/мл, при ДДГЖ с преобладанием кистозного компонента - 6,76±0,50 нг/мл, а при ДДМЖ с преобладанием фиброзного компонента - 7,66±0,25 нг/мл (в контрольной группе - 3,84 нг/мл). Соотношение 2-ОНЕ1/16αОНЕ1 при ДДМЖ с преобладанием железистого компонента составило 1,66, при ДДМЖ с преобладанием кистозного компонента - 1,25, а при ДДМЖ с преобладанием фиброзного компонента - 1,05 (в контрольной группе -2,58).

Таблица 8
Средний уровень (нг/мл) и коэффициент соотношения метаболитов эстрогенов у пациенток с ДДМЖ в зависимости от варианта терапии(M+m)

* - достоверные отличия (р< 0,05) по сравнению с «до лечения».

Полученные данные свидетельствуют о том, что у пациенток с мастопатией, в отличие от здоровых женщин, метаболизм эстрогенов, осуществляемый через систему цитохромов Р-450, преимущественно ориентирован на продукцию «агрессивного» метаболита 16αОНЕ1. Подобное смещение эстрогенного баланса создаёт предпосылки для усиленного образования устойчивого гормон-рецепторного комплекса (16αOHEl + ER), индуцирующего пролонгированный пролиферативный сигнал.

При курсовом в течение 4 недель применении БАД «Семена лопуха» в лечении мастопатии зарегистрировано достоверное увеличение и нормализация соотношения 2OНЕ1/16αOНЕ1 от 1,24 до 2,35 за счёт достоверного увеличения (+60%) уровня антипролиферативного метаболита 2 ОНЕ1 от 8,15+0,75 нг/мл до 13,63+1,05 нг/мл. В группе Плацебо через 12 недель выявлена тенденция к повышению значения показателя 16αОНЕ1, и за счёт этого сохранилась тенденция к снижению соотношения 2OНЕ1/16αOНЕ1 (от 1,23 до 1,12). Данный факт подтверждает гипотезу о нарастании со временем пролиферативного потенциала гормон-зависимых клеток при отсутствии патогенетического лечения.

Таким образом, проведённое контролируемое сравнительное рандомизированное клиническое исследование в параллельных группах эффективности и безопасности применения препарата БАД «Семена лопуха» при терапии фиброзно-кистозной мастопатии позволяет говорить о наличии у исследуемого препарата антипролиферативного эффекта, в том числе за счёт стимулирования образования в гормон-зависимых тканях антипролиферативного 2ОНЕ1 и улучшения, таким образом, соотношения 2-ОНЕ1/16αОНЕ1 в пользу первого.

При применении БАД «Семена лопуха» с целью лечения мастопатии происходит нормализация баланса соотношения основных цитокинов, участвующих в молекулярной регуляции патологической клеточной пролиферации гормонозависимой ткани молочных желёз.