Исследование безопасности препарата

ЭМ-Курунга изучена по некоторым параметрам системы GLP (Good Laboratore Practicae), отвечающей требованиям ГФ. На белых лабораторных мышах была исследована возможная токсичность, пирогенность, мутагенность, тератогенность и другие параметры ЭМ-Курунги. Предварительно мы оценивали внешний вид подопытных мышей, их живую массу, состояние мочеиспускания, акт дефекации, поведенческие реакции, потребление корма и воды.

Установлено, что длительное, в течение 20 дней, введение мышам в желудок через зонд 1-1,5 мл 5%-ной водной эмульсии ЭМ-Курунги не изменило у них поведенческих реакций, состояния шерстного покрова и слизистых, они были активными, подвижными, охотно поедали разнообразный корм. Мочеиспускание и акт дефекации у подопытных мышей не отличались от нормы. За период опыта живая масса подопытных мышей увеличилась на 12,1 % и составляла 28,80±1,45 г, при норме 23,80±1,49 г.

ЭМ-Курунга в острых и хронических опытах не вызывала у мышей повышения температуры тела, а также видимых уродств во втором поколении, т.е. препарат не обладал пирогенным и тератогенным действием. При закапывании 1%-ной водной эмульсии ЭМ-Курунги в глаза мышам, втирании ее в эпиллированный участок кожи животных (ежедневно в течение трех дней) не наблюдалось каких-либо аллергических проявлений действия препарата.

Оценку мутагенного влияния препарата проводили методом подсчета аномальных головок сперматозоидов. Для этого мышам однократно вводили внутрижелудочно препарат в дозе 1 мл, и через три дня оценивали выход максимального числа поврежденных сперматозоидов. Число аномальных головок сперматозоидов у самцов опытной группы составило 1,0-11,2%, а в контрольной группе - 1,4-11,5%, что соответствует уровню, характерному для спонтанного повреждения головок сперматозоидов - 9,4-35,0%.

Результаты этих опытов позволяют считать, что ЭМ-Курунга не обладает мутагенной активностью.

Под влиянием «ЭМ-Курунги» в крови подопытных животных увеличилось число лейкоцитов на 15,7 % и составило 9,45±0,41*10⁹/л, по сравнению с контролем - 8,17±0,35х10⁹/л. Кроме того, несколько изменилось соотношение отдельных форм лейкоцитов.

Результаты биохимических исследований сыворотки крови приведены в табл. 18. Из табл. 18 видно, что под влиянием ЭМ-Курунги у мышей подопытной группы возросло содержание в сыворотке крови общего белка на 23,3 %, глюкозы - на 12,3 %, мочевины - на 9,0 %, уровень холестерина снизился на 9,6 %. Активность аспартатаминотрансферазы увеличилась на 12,7 %, а аланинаминотрансферазы - на 10,2 %. Из этих изменений особенно значимым является увеличение в крови содержания общего белка и активности аминотрансфераз (последнее отражает тенденцию к повышению функции печени по переаминированию аминокислот).

Таким образом, сухая закваска ЭМ-Курунга не вызывала негативных последствий для организма подопытных мышей. Напротив, прослеживается тенденция к улучшению морфологической картины и биохимического спектра некоторых показателей крови. В результате введения ЭМ-Курунги у мышей наблюдалась интенсификация окислительно-восстановительных процессов как следствие увеличения числа эритроцитов и уровня гемоглобина; ослабление скрытых воспалительных процессов, а также некоторое усиление иммунологической устойчивости организма мышей. Мы наблюдали в крови у подопытных животных увеличение общего числа лейкоцитов и нивелирование дисбаланса их в лейкоформуле. Кроме того, отмечено улучшение протекания процессов обмена веществ, а также функционального состояния печени.

Таблица 18.

Влияние ЭМ-Курунги на биохимические показатели крови мышей

Испытание сочетанного применения сухих автолизированных пивных дрожжей и концентрата кормового «ЭМ-Курунга» (торговой марки ВетЭМ) в эксперименте на лабораторных животных.

Основной целью поставленного эксперимента являлось изучение влияния биологических добавок, состоящих из сухих пивных автолизированных дрожжей и концентрата кормового «ЭМ-Курунга» в разном сочетании с основным рационом, на организм крыс. В качестве основных показателей, характеризующих состояние животных, учитывались иммунологические и биохимические сдвиги в организме животных, клинические данные, патоморфологические изменения, а также прирост живой массы с определением химического состава мышечной ткани, безопасности мяса.

По материалам отчета ФГОУ ВПО «Саратовский государственный аграрный университет им. Н. И. Вавилова», 2004 г., руководитель исследований д.м.н., зав. кафедрой БОБХ, профессор Блинова В. А.

Для исследования безопасности по принципу аналогов были подобраны 25 крыс в возрасте 2,5-3 месяца. Животные были распределены на 5 групп (4 - опытные, 1 - контрольная) по 5 животных в каждой. Опыт проводился согласно приведенной схеме. Скармливание крысам общего рациона и препаратов осуществляли в течение 28 суток, при этом учитывали росто-весовые, патологические, бактериологические и общие клинические показатели опытных и контрольных животных. Схема опыта по изучению влияния биологических добавок на организм лабораторных животных.

Таблица 19.

Схема опыта

Примечание: ОР - общий рацион.
СПАД - сухие пивные автолизированные дрожжи,
ЭМ - препарат ВетЭМ.

Иммунологические исследования проводились на базе Всероссийского НИИ бруцеллеза и туберкулеза животных в секторе иммунитета.

Клинические, патоморфологические исследования, определение химического состава мышечной ткани крыс, безвредности применяемых препаратов, наращивание живой массы осуществлялось на базе научно-исследовательской лаборатории ВСЭ ИВМ ОмГАУ.

Для определения химического состава мышечной ткани крыс использовали данные по содержанию влаги, жира, белка, золы, КЭБ. Для определения безопасности мяса использовали показатели по содержанию пероксидазы, свинца, мышьяка, ртути, микробной обсемененности. Исследования по содержанию протеина, белка, аминокислот в сухих пивных дрожжах (неактивные), были выполнены на базе лаборатории физиологии и биохимии Сибирского НИИ птицеводства РАСХН. В опыте было изучено действие биологических добавок, в виде пробиотиков (СПАД и ЭМ-препарат) в различных сочетаниях и дозах, на организм лабораторных животных.

Результаты исследования показали, что животные во всех группах имели хорошую упитанность и удовлетворительное общее состояние, данные, по привесам общей живой массы за период исследования в контрольной группе составили 41,0 г. В опытной первой группе животные также имели хорошую упитанность и удовлетворительное общее состояние. Привесы общей живой массы за период исследования составили 49,0 г. Во второй опытной группе у одной крысы на 2 сутки отмечали угнетенное состояние, выраженное чиханье и видимые расчесы в области шеи, которые исчезли на 7 сутки исследования, у остальных крыс отклонений не обнаружено. Привесы общей живой массы по данной группе за период исследования составили 43,0 г. В третьей опытной группе животные были активны, общее состояние удовлетворительное. Привесы общей живой массы по данной группе за период исследования составили 46,0 г. В четвертой группе у одной крысы на

сутки наблюдали возбужденное состояние и выраженную агрессивность на протяжении всего периода исследований, у остальных крыс отклонений не обнаружено. Привесы общей живой массы по данной группе за период исследования составили 44,0 г.

Общий химический состав мышечной ткани крыс при применении пробиотиков представлен в таблице 20.

Таблица 20.

Химический состав мяса крыс

Результаты исследований по определению коэффициента эффективности белка (КЭБ) у крыс, получавших пробиотики, свидетельствуют об увеличении активности мышечных эндопептидаз. Показатели безопасности мяса крыс представлены в таблице 21.

Таблица 21.

Показатели безопасности мяса крыс

Результаты данных исследований свидетельствуют об отсутствии токсических веществ химического и микробного происхождения.

Патологоанатомические исследования показали, что при вскрытии крыс контрольной группы, у пяти животных патологоанатомических изменений не найдено, что подтверждается гистологическими исследованиями органов и тканей.

При проведении иммунологических исследований установили, что наиболее эффективным оказался подбор препаратов в 1 и 4 группах, в которых, совместно с общим рационном, применяли дрожжевой экстракт в сочетании с ЭМ-препаратом, что подтверждалось активацией метаболизма нейтрофилов и повышением содержания В-лимфоцитов и Т-киллеров, т.е. отмечалась стимуляция клеточного и гуморального иммунитета и отсутствие иммунодефицита. Следует отметить, что в группе, которой давали только общий рацион, в сочетании с дрожжевым экстрактом, иммунологические показатели крови несколько уступали группам, где дополнительно использовали ЭМ-препарат, но превосходили показатели контрольной группы. Это выражалось в более высоком содержании клеток крови, низком индексе стимуляции и более высоком уровне Т- и В-систем иммунитета.

Относительно биохимических показателей следует отметить, что они имели определенные различия в контрольной и опытной группах. Так, уменьшение количества холестерина в первой, второй и, особенно в четвертой группах свидетельствует об отсутствии жирового перерождения. Снижение концентрации триглицеридов (нейтральные жиры) во второй группе, по сравнению с контрольной, расценивалось как благоприятное для состояния здоровья явление. Не обнаружено каких либо сдвигов в уровне амилазы, что свидетельствует об отсутствии вредного воздействия применяемых биологических добавок на организм животных. Об этом же свидетельствует показатель лактатдегидрогеназы, соответствующий уровню здоровья животных. Снижение уровня мочевой кислоты в плазме крови крыс первой и четвертой группы, также следует отнести к благоприятному показанию, указывающему на нормальную функцию почек.

При сравнении четырех опытных групп с контрольной отмечается снижение уровня щелочной фосфатазы. Это свидетельствует об отсутствии негативного влияния на состояние мембран клеток костной ткани, внутрипеченочных и внепеченочных желчных путей, а также других тканей, содержащих щелочную фосфатазу (печень, почки).

Оценивая в целом эксперимент на лабораторных животных, следует отметить, что использование биологических добавок, включающих СПАД и ЭМ-препарат, оказало позитивное влияние на состояние организма животных. Прежде всего это проявилось в повышении иммунного статуса опытных животных, улучшении основных гематологических и биохимических показателей крови. Кроме того, применение пробиотиков - СПАД и ЭМ-препарата для животных в дозах: ДЭ - 1,0 и ЭМ - 0,5 г обеспечивает нормальный рост и развитие организма, высокую анаболитическую активность ферментных систем, что и приводит к приросту живой массы на 17-20 %.

(По материалам отчета ИВМ ОмГАУ 2008-2009 гг. «Изучение эффективности препарата нового поколения концентрат кормовой «ЭМ-Курунга» (торговой марки ВетЭМ) на разных видах животных» 2008-2009 гг., под руководством д.в.н., проф. Новицкого А. А.).